大家好，小柏来为大家解答以上问题。hplc改善分离的方法及原理，hplc提高分离效果的方法很多人还不知道，现在让我们一起来看看吧！
解答：
1、首先，我们需要知道分离度的概念。分离度的公式如下：
2、附上峰图，可以更好的理解表达。
3、其中tR1和tR2分别是峰1和峰2的保留时间；W1和W2是峰底(基线)处峰1和峰2的峰宽，即色谱峰拐点所构成的三角形底边的长度。
4、当R1.5时，两个峰可以完全分离。
5、提高分辨率意味着增加分辨率公式中R的值。从公式中可以看出，可以通过增加相对保留时间和减小峰宽来实现。当然，这只是一个理论方案，那么在实际应用中如何实现呢？
6、1.相对保留时间取决于组分和色谱柱的固有热力学性质。两种组分的保留时间差异越大，固定相对组分的选择性越高。两个峰的底部宽度越窄，柱效率越高。因此，选择合适的固定相，达到提高分离度的效果是非常重要的。同时，选择合适的流动相和流动相比例也可以提高分离效果。
7、其次，在大多数情况下，提高柱温可以提高分离效果。(请注意，并非所有都适用)
8、第三，可以使用离子对试剂。
9、用于分析电离能力强的样品，其原理是将分析物上的离子结合，形成保留在色谱柱上的分子。
10、常用的离子对试剂有：
11、用于酸性化合物：四丁基氢氧化铵、四丁基溴化铵和十二烷基三甲基氯化铵。
12、对于碱性化合物：戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠和癸烷磺酸钠。